食用菌菌絲繁殖快,易變異,菌種保藏難度較大?,F介紹幾種效果很好而且簡單易行的保藏新方法。
一: 斜面低溫保藏法這是一種最簡單的保藏法,即將生長旺盛無污染的斜面試管放入冰箱內,在4℃~6℃的低溫下保藏,以后每隔2-3個月移接于新鮮的斜面培養(yǎng)基上,培養(yǎng)后再繼續(xù)保藏(以補充菌絲的養(yǎng)分和水分,防止菌絲老化)。
二、液體石蠟保藏法:選用化學液體石蠟,高壓滅菌后放入40℃恒溫箱中數小時或干燥器中數日,用無菌吸管或注射器吸取液體石蠟,注入菌種試管。注入量應高出斜面尖端1厘米左右,塞上棉塞,用蠟封好,直立保藏在清潔、干燥、涼爽的低溫處,可保藏5年左右。
三. 孢子保藏法:用2×0.5×0.8厘米經滅菌的濾紙條吸附上孢子,可參考孢子分離法,然后把帶孢子的紙條放入無菌試管內,置干燥器內2—3天吸干水分,再改用膠塞。在冰箱或室溫內可保存多年。
四. 菌絲球保藏法:常用經滅菌的生理鹽水、無菌水、蒸餾水、營養(yǎng)液等裝入試管約5毫升作媒介,把經過液體培養(yǎng)至對數生長期的菌絲球4—5個,移入媒介內,用膠塞封口,冰箱攝氏4度或室溫可保存1—2年。
五. 液氮保藏法:常用經滅菌10%甘油蒸餾水或10%二甲基亞砜蒸餾水為保護劑,注入斜面母種管,刮下菌絲體成懸浮液或孢子液,吸取菌液0.5—0.8毫升注入已滅菌安瓿管,熔封管口,置液氮冷凍器內,每分鐘降攝氏1度,1小時內使其溫度降至攝氏負35度,其后迅速降至氣相攝氏負150度,液相攝氏負196度保存。保存期可超過10年。
六、麩皮保藏法:稱取一定量的麩皮加水或營養(yǎng)液后拌勻后拌勻即可使用。水、麩皮比例約為1:0.8。拌好的麩皮裝入試管,高壓滅菌后接入菌種,放在適溫下培養(yǎng)。菌絲體發(fā)育好,將試管放入干燥室溫下進行干燥。干燥后放在20℃以下干燥處保藏,可保藏3-5年時間。
七、生理鹽水保藏法:將菌種接入馬鈴薯培養(yǎng)液中,每250毫升三角瓶裝60毫升培養(yǎng)液,振蕩培養(yǎng)或每天搖動5-10次,培養(yǎng)5-7天,然后將形成的菌絲球吸入裝有5毫升無菌生理鹽水的試管中,每管約移入4-5個菌絲球,塞上棉塞,用蠟封好管口,置低溫下可保藏1年
八、麥粒保藏法:取優(yōu)質小麥,淘洗后浸入20℃水中泡5小時,稍加晾干,裝管。裝入量以管長的1/4到1/3為宜,滅菌,趁熱搖散,冷卻后接入菌絲體,室溫培養(yǎng)至大多數麥粒上出現稀疏菌絲時終止培養(yǎng)。置于25℃以下干燥處,可保藏1-2年。
一: 斜面低溫保藏法這是一種最簡單的保藏法,即將生長旺盛無污染的斜面試管放入冰箱內,在4℃~6℃的低溫下保藏,以后每隔2-3個月移接于新鮮的斜面培養(yǎng)基上,培養(yǎng)后再繼續(xù)保藏(以補充菌絲的養(yǎng)分和水分,防止菌絲老化)。
二、液體石蠟保藏法:選用化學液體石蠟,高壓滅菌后放入40℃恒溫箱中數小時或干燥器中數日,用無菌吸管或注射器吸取液體石蠟,注入菌種試管。注入量應高出斜面尖端1厘米左右,塞上棉塞,用蠟封好,直立保藏在清潔、干燥、涼爽的低溫處,可保藏5年左右。
三. 孢子保藏法:用2×0.5×0.8厘米經滅菌的濾紙條吸附上孢子,可參考孢子分離法,然后把帶孢子的紙條放入無菌試管內,置干燥器內2—3天吸干水分,再改用膠塞。在冰箱或室溫內可保存多年。
四. 菌絲球保藏法:常用經滅菌的生理鹽水、無菌水、蒸餾水、營養(yǎng)液等裝入試管約5毫升作媒介,把經過液體培養(yǎng)至對數生長期的菌絲球4—5個,移入媒介內,用膠塞封口,冰箱攝氏4度或室溫可保存1—2年。
五. 液氮保藏法:常用經滅菌10%甘油蒸餾水或10%二甲基亞砜蒸餾水為保護劑,注入斜面母種管,刮下菌絲體成懸浮液或孢子液,吸取菌液0.5—0.8毫升注入已滅菌安瓿管,熔封管口,置液氮冷凍器內,每分鐘降攝氏1度,1小時內使其溫度降至攝氏負35度,其后迅速降至氣相攝氏負150度,液相攝氏負196度保存。保存期可超過10年。
六、麩皮保藏法:稱取一定量的麩皮加水或營養(yǎng)液后拌勻后拌勻即可使用。水、麩皮比例約為1:0.8。拌好的麩皮裝入試管,高壓滅菌后接入菌種,放在適溫下培養(yǎng)。菌絲體發(fā)育好,將試管放入干燥室溫下進行干燥。干燥后放在20℃以下干燥處保藏,可保藏3-5年時間。
七、生理鹽水保藏法:將菌種接入馬鈴薯培養(yǎng)液中,每250毫升三角瓶裝60毫升培養(yǎng)液,振蕩培養(yǎng)或每天搖動5-10次,培養(yǎng)5-7天,然后將形成的菌絲球吸入裝有5毫升無菌生理鹽水的試管中,每管約移入4-5個菌絲球,塞上棉塞,用蠟封好管口,置低溫下可保藏1年
八、麥粒保藏法:取優(yōu)質小麥,淘洗后浸入20℃水中泡5小時,稍加晾干,裝管。裝入量以管長的1/4到1/3為宜,滅菌,趁熱搖散,冷卻后接入菌絲體,室溫培養(yǎng)至大多數麥粒上出現稀疏菌絲時終止培養(yǎng)。置于25℃以下干燥處,可保藏1-2年。