原種和栽培種的制備
      試管母種一般都不能直接用作栽培接種，而要經(jīng)過移植馴化，使其適應栽培條件后方可采用。通常母種分離出來后，要移植到相適應的原種培養(yǎng)基中進行馴化，一般每支母種可移接原種6～8瓶。它雖然可以用于栽培播種，但數(shù)量太少，不經(jīng)濟，還要采用同樣的方法將原種擴接培養(yǎng)成栽培種，才能滿足生產(chǎn)上的需要，一般每瓶原種可擴接栽培種70～80瓶。 具體制備方法如下：
      （一）原種和栽培種培養(yǎng)基的配制
      1.培養(yǎng)基的種類 凡木生的食用菌可用木屑——米糠培養(yǎng)基；凡草生的食用菌可用稻草或糞草培養(yǎng)基。
      （l） 木屑一米糠培養(yǎng)基（適于香菇、銀耳、黑木耳、猴頭、平菇等）
      雜木屑 78％ 米糠或麥皮 20％
      蔗糖 10％ 石膏粉 l％
      制法是先將蔗糖溶于清水中，然后和雜木屑、米糠（或麥皮）等材料拌和。培養(yǎng)基的含水量以60％～65％為宜，加水量隨木屑種類而異，一般每百斤干料加水120～150斤，以手緊握培養(yǎng)基，指間有水泌出而又不下滴為度。培養(yǎng)基配好后，裝入菌種瓶中，用尖形木棒在培養(yǎng)基中鉆一直通瓶底的洞孔，使滅菌更徹底，也有利于菌絲的蔓延。瓶內(nèi)外洗凈后，擦干，塞上棉塞，瓶口用牛皮紙包扎緊。
      （2） 糞草培養(yǎng)基（適于培養(yǎng)蘑菇菌種）
      糞草 95％ 麥皮 3％
      蔗糖 1％ 石膏紛 1％
      制法是先將糞草堆積發(fā)酵，糞草比5：5，發(fā)酵時間18～20天，翻堆2～3次，曬干，切碎，裝瓶。
      （3） 稻草培養(yǎng)基（適于草菇、平菇、鳳尾菇等）
      稻草 80％ 米糠或麥皮 18％
      蔗糖 1％ 石膏粉 1％
      制法是先將稻草切成1厘米長的小段，用水浸濕，堆制1～2天，待稻草吸水軟化后，拌入18％米糠（或麥皮）以及蔗糖和石膏粉，培養(yǎng)基含水量達65％；然后裝瓶。
      （4） 種木培養(yǎng)基（適于香菇、銀耳、黑木耳等木生食用菌 段木接種）
      種木 70％ 木屑 10％
      米糠 18% 蔗糖 1％
      石膏粉 1％
      制法是先將種木（有圓形種木和楔形種木兩種）在清水中浸一夜，待種木充分吸水后，再拌入木屑和米糠等，然后裝瓶。
      （5） 麥粒培養(yǎng)基（適于蘑菇、猴頭、鳳尾菇等）
      麥粒 80％ 木屑 18％
      蔗糖 1％ 石膏粉 1％
      制法是先將麥粒洗凈，浸泡一夜吸水膨脹后，置鍋中煮沸半小時，至熟而不爛，撈起濾去多余的水，加入其它配料混拌均勻。調(diào)節(jié)好適宜的酸堿度，含水量為60％～65％，然后逐一分裝菌種瓶巾，邊裝邊壓實，裝至瓶高1/2或3/5處壓平（應在表面鋪一層木屑后壓平），中間扎一圓洞，洗凈瓶壁和瓶口，用布擦干，塞上棉花，并用牛皮紙包扎好瓶口。
      2.培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基配制好后，即可進行高壓或常壓蒸汽滅菌。
      （1）常壓滅菌 利用蒸籠或土消毒灶滅菌，設備比較簡單，適合農(nóng)村群眾生產(chǎn)，但一次不宜過多，一般1000瓶左右為好。滅菌時間待鍋內(nèi)蒸汽上升后，保持6～8小時，卻出冷即后就可接種。
      （2）高壓滅菌 利用高壓鍋產(chǎn)生的蒸汽壓進行殺菌。具體操作，把料瓶裝火鍋內(nèi)，加熱至壓力達到0.5公斤／厘米2 時，放出冷氣，使壓力回到零，關好閥門，繼續(xù)加熱使壓力上升到1.5公斤／厘米2 時，保持1.5～2小時，然后徐徐放出蒸汽，壓力回到零后，打開鍋蓋取出料瓶。
      （二）接種、培養(yǎng)
      培養(yǎng)基經(jīng)配制和滅菌后，便可進行接種。為避免接種過程中污染雜菌，接種工作要在無菌室或接種箱中進行。無菌室的體積要求不宜過大，一般6～8立方米，能供一、二人操作即可。室內(nèi)裝有紫外線殺菌燈，門窗關閉后里面的空氣能與外界隔絕，經(jīng)消毒就能造成無菌條件。若沒有無菌室也可用潔凈的小房間代替，但必須進行嚴格的消毒滅菌。接種箱是代替無菌室的密閉透明小箱。具有體積小，簡單輕便，消毒徹底等優(yōu)點。一般長100厘米，寬60厘米，高50～60厘米，頂部向兩邊傾斜，安裝透明玻璃。箱里裝有紫外線殺菌燈，或用福爾馬林和高錳酸鉀混合熏蒸滅菌，人在箱外，只用兩只手伸入箱內(nèi)進行接種操作，效果好，成功率高。
      無菌室和接種箱的滅菌方法，常用的有下列幾種：
      1.紫外燈滅菌 用于空氣中滅菌，30瓦紫外燈距桌面1米照射15分鐘或30分鐘。
      2.化學藥品滅菌 所用化學藥品的種類甚多，主要的是：
      （1）70％酒精 用于接種針以及接種人員的手和玻璃器具的表面殺菌。
      （2）5％石碳酸 用于空間噴霧滅菌。
      （3）0.1％升汞水 用于分離材料的表面消毒。
      （4）甲醛溶液 用于空間熏蒸滅菌，可將福爾馬林放在瓷器中，直接加熱使其蒸發(fā)，或于容器中先加入高錳酸鉀，其用量為福爾馬林重量的10％以上，然后倒入福爾馬林，使其蒸發(fā)，一般每一立方米體積用10毫升福爾馬林即可。
      3.火焰滅菌 用于接種針或其他金屬用具的滅菌，可直接在酒精燈火焰上燒紅。此外，在接種過程中，將試管口，菌種瓶口等采用通過火焰的方式也可達到滅菌的目的。
      培養(yǎng)基經(jīng)滅菌之后，在無菌室或接種箱中，用接種針在酒精燈火焰上，迅速從試管母種中挑一小塊帶有培養(yǎng)基的菌絲體，放在瓶內(nèi)的培養(yǎng)基上即成原種。接種后的原種應放在培養(yǎng)室中培養(yǎng)，培養(yǎng)室的大小要適當，過大保溫比較困難。四周墻壁用磚砌，石灰粉刷，地面鋪水泥，設有通氣窗，最好有調(diào)溫調(diào)濕裝置，并嚴格做好消毒滅菌。溫度保持在23～26℃之間，培養(yǎng)一個月左右，待菌絲長滿全瓶后，即可用來接栽培種。
      栽培種的培養(yǎng)基其配制方法和滅菌等大致與原種相同，但裝瓶應滿些，至瓶肩處為宜。一般每瓶原種可轉(zhuǎn)接栽培種60～80瓶。